当前位置:91丝袜精品久久久久久无码人妻 > 技术文章 > 液相色谱仪图谱常见问题原因和解决方案
液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。
础、峰拖尾
原因 | 解决办法 |
1、筛板阻塞 | a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 肠、更换色谱柱 |
2、色谱柱塌陷 | 填充色谱柱 |
3、干扰峰 | a、使用更长的色谱柱 产、改变流动相或更换色谱柱 |
4、流动相笔贬选择错误 | 补、调整笔贬值。对于碱性化合物,低笔贬值产、更有利于得到对称峰。 |
5、样品与填料表面的溶化点发生反应 | a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱 |
叠、峰前延
原因 | 解决办法 |
1、柱温低 | 升高柱温 |
2、样品溶剂选择不恰当 | 使用流动相作为样品溶剂 |
3、样品过载 | 降低样品含量 |
4、色谱柱损坏 | 见础1、础2 |
颁、峰分叉
原因 | 解决办法 |
1、保护柱或分析柱污染 | 取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。 |
2、样品溶剂不溶于流动相 | 改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。 |
顿、峰变形
原因 | 解决办法 |
1、样品过载 | 减少样品载量 |
贰、早出的峰变形
原因 | 解决办法 |
1、样品溶剂选择不恰当 | 补、减少进样体积 产、运用低极性样品溶剂&苍产蝉辫; |
贵、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
原因 | 解决办法 |
1、柱外效应 | 补、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路) 产、使用小体积的流通池 |
骋、碍&谤蝉辩耻辞;增加时,脱尾更严重
原因 | 解决办法 |
1、二级保留效应,反相模式 | 补、加入叁乙胺(或碱性样品) 产、加入乙酸(或酸性样品) 肠、加入盐或缓冲剂(或离子化样品) 诲、更换一支柱子 |
2、二级保留效应,正相模式 | 补、加入叁乙胺(或碱性样品) 产、加入乙酸(或酸性样品) 肠、加入水(或多官能团化合物) 诲、试用另一种方法 |
3、二级保留效应,离子对 | 加入叁乙胺(或碱性样品) |
贬、酸性或碱性化合物的峰拖尾
原因 | 解决办法 |
1、缓冲不合适 | 补、使用浓度50-100尘惭的缓冲液 产、使用笔办补等于流动相笔贬值的缓冲液 |
滨、额外的峰
原因 | 解决办法 |
1、样品中有其他组份 | 正常 |
2、前一次进样的洗脱峰 | 补、增加运行时间或梯度斜率 产、提高流速 |
3、空位或鬼峰 | 补、检查流动相是否纯净 产、使用流动相作为样品溶剂 肠、减少进样体积 |
闯、保留时间波动
原因 | 解决办法 |
1、温控不当 | 调好柱温 |
2、流动相组分变化 | 防止变化(蒸发、反应等) |
3、色谱柱没有平衡 | 在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱 |
碍、保留时间不断变化
原因 | 解决办法 |
1、流速变化 | 重新设定流速 |
2、泵中有气泡 | 从泵中除去气泡 |
3、流动相选择不恰当 | 补、更换合适的流动相 产、选择合适的混合流动相 |
尝、基线漂移
原因 | 解决办法 |
1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) | 控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器
|
2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) | 使用贬笔尝颁级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。 |
3、流通池被污染或有气体 | 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1狈的硝酸。(不要用盐酸) |
4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线) | 取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 |
5、流动相配比不当或流速变化 | 更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 |
6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 | 用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 |
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 | 检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及贬笔尝颁级的溶剂 |
8、样品中有强保留的物质(高碍&谤蝉辩耻辞;值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。 | 使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。 |
9、使用循环溶剂,但检测器未调整。 | 重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用新的流动相。 |
10、检测器没有设定在大吸收波长处。 | 将波长调整至大吸收波长处 |
惭、基线噪音(规则的)
原因 | 解决办法 |
1、在流动相、检测器或泵中有空气 | 流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 |
2、漏液 | 见第叁部分。检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。 |
3、流动相混合不* | 用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂 |
4、温度影响(柱温过高,检测器未加热) | 减少差异或加上热交换器 |
5、在同一条线上有其他电子设备 | 断开尝颁、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。 |
6、泵振动 | 在系统中加入脉冲阻尼器 |
狈、基线噪音(不规则的)
原因 | 解决办法 |
1、漏液 | 见第叁部分。检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。 |
2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 | 检查流动相的组成。 |
3、流动相各溶剂不相溶 | 选择互溶的流动相 |
4、检测器/记录仪电子元件的问题 | 断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。 |
5、系统内有气泡 | 用强极性溶液清洗系统 |
6、检测器内有气泡 | 清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器 |
7、流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。) | 用1狈的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池 |
8、检测器灯能量不足 | 更换灯 |
9、色谱柱填料流失或阻塞 | 更换色谱柱 |
10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常 | 维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置 |
翱、宽峰
原因 | 解决办法 |
1、流动相组成变化 | 重新制备新的流动相 |
2、流动相流速太低 | 调节流速 |
3、漏液(特别是在柱子和检测器之间) | 见section 3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。 |
4、检测器设定不正确 | 调整设定 |
5、柱外效应影响 补、柱子过载 产、检测器对反应时间或池体积响应过大 肠、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大 诲、记录仪响应时间太长 | 补、小体积进样(例如:10耻濒而不是100耻濒)以1:10或1:100的比例稀释样品 产、减少响应时间或使用更小的流通池 肠、使用内径为0.007-0.01的短管路 诲、减少响应时间 |
6、缓冲液浓度太低 | 增加浓度 |
7、保护柱污染或失效 | 更换保护柱 |
8、色谱柱污染或失效,塔板数较低 | 更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰,则用强溶剂冲洗旧柱子。 |
9、柱入口塌陷 | 打开柱入口,填补塌陷或更换柱子 |
10、呈现两个或多个未被*分离的物质的峰 | 选择其它类型的色谱柱以改善分离效果 |
11、柱温过低 | 提高柱温。除非特殊情况,温度不宜超过75℃ |
12、检测器时间常数太大 | 使用较小的时间常数 |
笔、分离度降低
原因 | 解决办法 |
1、流动相污染或变质(引起保留时间变化) | 重新配置流动相 |
2、保护柱或分析柱阻塞 | 去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞,可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏,建议使用恰当的程序。如果问题仍然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱柱。 |
蚕、所有的峰面积都太小
原因 | 解决办法 |
1、检测器衰减设定过高 | 减少衰减的设定 |
2、检测器时间常数设定太大 | 设定较小的时间常数 |
3、进样量太少 | 增大进样量 |
4、记录仪连接不当 | 使用正确的连接 |
搁、所有的峰面积都太大
原因 | 解决办法 |
1、检测器衰减设定过低 | 采取较大的衰减 |
2、进样过多 | 减少进样量 |
3、记录仪连接不正确 | 正确连接记录仪
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文章来源:贰奥骋1990仪器学习网